肺癌的治疗靶点及相关药物开发

 

传统的放疗、化疗因为缺乏特异性，在治疗癌症的同时可累及人体正常细胞，并引起较大的毒副反应，严重影响息者的生活质量。随着分子生物学、人类基因组学和药剂学的不断发展，特异性作用于肺癌细胞，对正常细胞无影响或很少影响的靶点治疗药物成为可能，其在疗效明确的同时，可避免或减轻对正常细胞的损伤.从而降低不良反应的发生率。广州医学院附属肿瘤医院胸外科薛兴阳
靶向药物或药物制剂日渐成为人们关注的焦点.新药及其制剂的开发目前主要针对与正常细胞具有明显差异的肿瘤细胞特异性受体以及肿瘤发生发展的相关基因的突变和表达.如表皮生长因子受体(EGFR),人表皮生长因子受体一(HER一2),叶酸受体(FR)以及k一ras基因等。研制与这些受体特异性结合或针对相关基因的药物或者药物制剂，可以提高药物对肺癌的靶向性，减少对正常细胞的损伤。
作用靶点及相关药物开发
>>>表皮生长因子受体(EGFR)
EGFR是一种受体酪氨酸激酶(RTK)，非小细胞肺癌(NSCLC)、膀胱癌、子宫颈癌、卵巢癌、肾癌和胰腺癌细胞常有EGFR过度表达，如60%一85%的NSCLC细胞存在EGFR过度表达。抑制EGFR的过度表达可以抑制肿瘤细胞的生长。吉非替尼(gefitinib，Iressa)作为表皮生长因子一酪氨酸激酶(EGFR一TK)拮抗剂，主要与AT户竞争结合RTK的ATP结合位点，阻断RTK的活化Vl。吉非替尼目前已在美国、日本和欧洲上市，用于NSCLC的二线和三线治疗。我国15个医学中心针对复发性或含铂方案治疗失败的NSCLC患者的临床研究侧，超过600例息者接受吉非替尼单药治疗，结果显示，有效率为22.2%一47.7%，中位生存时间为5.0-9.9个月，疾病控制率为52.7%一81.8;吉非替尼可改善NSCLC患者的生活质量，其主要不良反应为消化道反应和痊疮样皮疹，患者一般能耐受，曾报道吉非替尼可引起肺间质纤维化131，临床和药学界应关注有关事件。
>>>血管内皮生长因子(VEGF)及其受体
在多种血管生成因子中，VEGF的表达与肿瘤微血管密度(MVD)成正比，VEGF诱导肿瘤血管生成作用极强、特异性极高，与肺癌的发生、转移及患者预后密切相关。VEGF受体(VEGFR)为RTK受体，主要有VEGFR一21(fit-1)和VEGFR一2(tlk一11KDR)两种，应用杭V三G厂单抗、抗VEGFR(fit一2)单杭及突变型或可溶性VEGFR阻断或封闭VEGF与VEGFR的结合，抑制血管内皮细胞增殖，可有效抑制肿瘤的生长和转移。包括NSCLC在内的多种实体瘤动物模型试验已证实，针对KDR的RTK抑制剂vandetanib(Zactima，ZD6474)，长期服用具有显著的抗肿瘤作用。VEGF的另一特异性受体Neuropi一in21IB1,可调节VEGF与其受体们k一11KDR的结合，影响VEGF的生物活性，从而调控血管生成。贝伐单抗(bevacizumab)为重组人抗VEGF配体单克隆抗体，开发用于NSCLC、结肠直肠癌和乳腺癌治疗闭。
>>HER-2或HER一2/neu
16%-57%的NSCLC存在HER-2/neu基因的过度表达，HER-2在正常细胞中的表达较少.是极具特异性的肿瘤相关蛋白之一，是目前肺癌治疗的又一靶点。群司珠单抗(trastuzumab，Herceptin)为针对HER一2/neu原癌基因产物的人，鼠嵌合单抗，可刺激HER-2受体的内化和降解，抑制HER-2/neu基因的过度表达，从而抑制肿a细r的转化和生长。英国临床评估署(NICE)于2002年向英国国家卫生保健系统(NHS)推荐群司珠单抗用于晚期乳腺癌治疗。一项有209例晚期NSCLC患者参与的Ⅱ期临床研究，其中有HER-2受体过度表达的24例((1，%)患者，接受单一群司珠单抗治疗，仅，例获得部分疗效，1例因肺部毒副反应死亡。提示，单用群司珠单抗治疗HER-2受体过度表达的晚期NSCLC患者，疗效不显著。有报道191显示，群司珠单杭与卡铂+紫杉醇联用治疗晚期NSCLC患者，有效率达24.50，虽与卡铂+紫杉醇相比，优势并不显著，但对于HER-2/neu(++)或(+++)的患者，联合群司珠单抗治疗的疗效优势显著。
>>>p53
p53是人体肿瘤中出现频率极高的肿瘤抑制基因，
对细胞分裂和增殖具负调节作用。肺癌息者，尤其是NSCLC患者.约50%一70%存在p53基因突变。因此应用野生型p53基因(wtp53)进行基因替代治疗，有可能维持细胞基因的稳定与完整，是目前临床研究的主要治疗策略[10一12]0高表达p53基因加顺铂或者电离辐射可协同诱导癌细胞的凋亡.p53基因治疗的I、“期临床研究已证实其治疗的安全性。此外，p53基因还参与调控肿瘤血管的形成，因此，将野生型p53基因导人肿瘤细胞可抑制肿瘤细胞内VEGF的表达.控制肿瘤细胞的生长和转移。扮核因子-KB(NF-B)
NF-KB是广泛存在于细胞中(包括肿瘤细胞在内)的调控细胞增殖、分化和生长的诱导转录因子，与肿瘤的形成和发展有关。NF一KB抑制剂AdlKBa可抑制肺癌细胞株H460细胞中的NF-KB的活性，从而明显抑制癌细胞增殖。针对接种H460肺癌细胞株的人瘤体内注射NF一KB抑制剂，可见AdlKBa通过抑制NF一‘B活性和抑制VEGF表达两种途径抑制肿瘤的生长112)a
环氧合酶-2(COX一2)
Cox-2在多种实体瘤中过度表达，且与癌症的发生相关联，是癌症治疗的潜在靶位。一项针对肺癌细胞的试验[14]报道，将12组硫代磷酞化的反义寡脱氧核普酸(asODN)嵌入Cox一2mRNA的6个靶位并导入A549肺腺癌细胞株，分别以逆转录酶聚合酶链反应[PCR)和流式细胞计量术测定Cox一2mRNA和蛋白质表达水平。干预组的COX-2mRNA减少，蛋白质表达水平降低，最大分别降低66%和75%。表明asODN能直接作用于Cox-2mRNA，抑制肿瘤细胞Cox-2的表达，具有明显的抑瘤作用。
>>>k-ras基因
约113肺腺癌患者存在癌基因k-ras的突变。将反义k-ras基因转移入有k-ras基因突变的细胞中，阻断k-ras基因的表达，可抑制细胞的增殖和肿瘤形成。此外，已有抗-K-ras核酶腺病毒载体成功抑制异种移植肺癌生长的报道.
肿瘤疫苗
肺癌细胞除具有无限制增殖、分裂、生长和转移的特性之外，还具有抗原性，能引起宿主的特异性免疫反应。因此，将肺癌细胞的特异性肺癌抗原进行处理，制成肿瘤疫苗，能使机体产生特异性抗肺肿瘤的免疫应答，达到特异性杀伤肿瘤细胞的目的。
>>>树突状细胞疫苗
树突状细胞(DC)是功能极强的特异性抗原递呈细胞(APC)。抗肿瘤免疫反应主要依赖于DC将肿瘤抗原呈递给T淋巴细胞.肿瘤免疫逃避往往与肿瘤抗原性减弱、DC等免疫效应细胞功能缺陷有关，DC在诱导针对相关肿瘤抗原的高效、特异性丁细胞应答中具有重要作用。目前该疫苗的制备主要有两种方法:一是以肿瘤细胞裂解物或抗原肤冲击DC制备疫苗;二是将编码肿瘤抗原的cDNA.细胞因子的基因导入或修饰DC，使之持续致敏，达到免疫治疗效果。
>>>核酸疫苗
核酸疫苗包括DNA疫苗和RNA疫苗，由能引起保护性免疫反应的抗原基因片断及其载体构成，在体内可高度表达相应抗原。其被DC摄取并使之致敏后，可诱导机体的高效细胞免疫反应和体液免疫反应.Niethammer等制备了含人癌胚抗原(CEA)的全基因DNA疫苗，免疫CEA转基因小鼠后，诱导主要组织相
容性复合体(MHC)l类抗原限制性CD8+T细胞介导的肿瘤保护性免疫，可阻止Lewis肺癌的生长和在肺部的转移.
粉其他疫苗
肿瘤细胞本身免疫原性弱，制备肿瘤细胞疫苗时，应用理化或生物方法处理肿瘤细胞，暴露肿瘤抗原，或将肿瘤细胞疫凿加入佐剂，提高肿瘤免疫原性。经APC处理后的多肤与组织相容性复合体I类分子结合，表达于细胞表面，供T细胞受体识别，引发细胞毒淋巴细胞(CTIL)的免疫应答。构建p2l突变肤、EGFRy突变肤、Her2/neu肽、WT1肽等疫苗，对肺癌预防有一定价值。
制剂开发
被动靶向是利用药物载体微粒(乳剂、脂质体、微囊、微球等)携带治疗药物，通过正常生理过程使药物选择性地聚集在肿瘤部位，达到高效且不良反应低的目的，在肺癌治疗中有重要临床意义。以微球为例，微球混悬剂静脉注射后，首先进入肺毛细血管网，若微球直径大于肺邵毛细血管网直性(3~11um)，微球就被肺毛细血管网有效截获，使药物在肺部聚集。目前国外已以微球运载99mTc进行肺靶向核素扫描，用于肺癌诊断。国内学者研制的顺铂白蛋白微球，静注后90%以上滞留于肺部。米托葱醒明胶微球.在小鼠体内组织分布也显示了良好的肺靶向性。有研究者选用对肺癌有效的抗癌药为模型.以明胶M5为载体.通过控制粒度大小，将药物导向肺，可提高疗效，减少剂量，降低不良反应。其他叶酸是一种维生素，可以通过低亲和力的跨膜蛋白将叶酸直接导入胞浆，或通过肿瘤细胞过度表达的高亲和力叶酸受体介导细胞内化将叶酸摄入胞浆。生长激素释放激素[GHRH]受体拮抗剂及其类似物，通过抑制垂体生长激素、肝一胰岛素样生长因子-(IGF-I),或抑制肿瘤细胞胰岛素样生长因子-II(IGF-II)的分泌，也可抑制包括NSCLC在内的多种肿瘤的生长。其它正在开发研究的靶向药物还有法尼基转移酶抑制剂，主要以H-ras,着丝蛋白-E,着丝蛋白-F和P13KIAkt为靶点。正在进行临床研究的主要有8115777、SCH66336,BMS214662和SCH66336(sarasar)，主要通过抑制ras基因介导的生长信号转导而发挥抗癌活性.在欧美国家已经进入Ⅱ、Ⅲ期临床圈。TLK236作为谷肤甘肤类似物.在肿瘤细胞中被谷胱甘肽-5-转移酶激活后可启动细胞凋亡，其对化疗耐药的肿瘤具有靶向治疗作用，可作为二线治疗药物。
肺癌的靶向治疗是肺癌治疗的新途径、新领域，有着广阔的发展前景。如何将靶向药物更好地与传统放疗和化疗相结合，发挥协同抗癌作用，是当今靶向治疗个体化的努力方向。