P选择素在先天性心脏病肺动脉高压中的变化

先天性心脏病（简称先心病）患者存在止血功能的异常，容易发生血栓形成和出血，血小板的活化是引起其止血功能异常的重要因素。P选择素是研究中最广泛应用的颗粒膜蛋白活化依赖性单克隆抗体，存在于静息血小板α颗粒和内皮细胞Weibel-Palade小体中，激活后转移至浆膜表达，为血小板活化的敏感标志物。目前对血小板的活化是否介导先心病肺动脉高压尚无肯定的结论，本文探讨了血小板活化释放的P选择素在先心病肺动脉高压中的变化。山东大学齐鲁医院小儿内科杨杰

资 料 与 方 法

一、对象 36例实验对象依据研究内容分为对照组12例，均为健康体检者，其中男8例，女4例，年龄4月～2岁，平均年龄1.33±0.71岁；左向右分流先心病不伴肺动脉高压组12例，其中男8例，女4例，年龄9月～7岁，平均年龄3.94±2.07岁；肺动脉高压组12例，其中男8例，女4例，年龄10月～16岁，平均年龄4.84±5.09岁。按肺动脉压力升高的程度分为轻度肺动脉高压（肺动脉收缩压30～40mmHg）、中度肺动脉高压组（肺动脉收缩压40～70mmHg）、重度肺动脉高压（肺动脉收缩压70mmHg以上）^[1]，本组无轻度肺动脉高压，中、重度肺动脉高压各6例。

二、方法 异硫氰酸荧光素标记的血小板P选择素抗体（CD62P-FITC）由北京晶美生物工程公司提供,FACSVantage流式细胞仪由美国Becton-Dickinson公司提供。由于P选择素在一天当中呈动态变化，为排除时间因素的影响，抽血时间选择为清晨7～9时^[2],流式细胞仪分析血小板P选择素。

    三、统计学处理 应用SPSS14.0软件进行统计学处理，数据用`x±s表示，应用秩和检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

结    果

      表1  先心病组与对照组P选择素比较

      组别     n        P选择素（%）  Z值    P

     对照组     12      1.05±0.92   

     先心病组   24      16.32±9.74  -4.833 0.000

表1 P＜0.05,表明与健康查体者比较，先心病患者P选择素明显升高。

    表2  不同肺动脉压组与对照组P选择素比较

        组别         n   P选择素（%）   H值    P

       对照组        12   1.05±0.92    

不伴肺动脉高压组 12  18.95±12.46  23.692  0.000

肺动脉高压组     12  13.69±5.31    

不伴肺动脉高压组、肺动脉高压组与对照组P选择素比较，H=23.692，P＜0.05，可认为与对照组比较，左向右分流先心病不伴肺动脉高压组、肺动脉高压组P选择素明显升高。

左向右分流先心病不伴肺动脉高压组与肺动脉高压组相比，Z=-0.866，P=0.386(＞0.05),可认为两组P选择素水平无显著差异。

       表3  中、重度肺动脉高压组P选择素比较

       组别            n    P选择素（%）  Z值    P

中度肺动脉高压组   6    14.64±4.67

重度肺动脉高压组   6    12.74±6.16  -0.480 0.631

表3 P＞0.05，表明中度肺动脉高压组与重度肺动脉高压组P选择素水平差异无显著性。

讨    论

    先心病患者存在复杂的出血和凝血功能异常，临床上主要表现为溶血现象、红细胞增多症和凝血机制异常。活化血小板与静息血小板相比，膜糖蛋白常发生显著变化，血小板被激活时，其颗粒膜与质膜融合为颗粒膜蛋白，P选择素在质膜上表达，成为活化血小板的分子标志。较为一致的观点是先心病患儿存在血小板的活化状态，我们的结果与之相似（表1）。左向右分流先心病不伴肺动脉高压组、肺动脉高压组P选择素水平与健康查体者相比均显著升高，两组均存在血小板的活化（表2）。

    先心病继发肺动脉高压与血小板活化状态之间的相关性目前尚无统一的结论。Schulman^[3]等以血小板因子4（PF4）和β血小板球蛋白（β-TG）作为血小板的活化指标（两者均为血小板α颗粒特有的物质），研究认为，先心病引起的继发性重度肺动脉高压和原发性重度肺动脉高压与健康对照组比较，血小板的活化状态无显著差异，已有肺动脉高压的患者，不存在血小板的异常活化状态和纤维蛋白的合成与降解。Fuse等^[4]以血浆内血栓烷B₂（TXB₂）为对象（TXB₂是TXA₂的稳定代谢产物，其含量可间接反映血小板的活化程度），研究了先心病所致的肺动脉高压血小板的活化功能，认为先心病肺动脉高压患者血小板活化功能增强导致TXA₂释放增加，尤其是伴有呼吸困难和肺血管阻力≤10U/m² 者；血小板所释放的TXA₂可能引起肺小动脉和支气管收缩，从而加重了这些患者的肺动脉高压和呼吸困难。我们的研究结果提示左向右分流先心病不伴肺动脉高压组和肺动脉高压组之间、中度和重度肺动脉高压组之间P选择素的差异无统计学意义（表2、3）。

    Welsh^[5]等认为原发性和继发性肺动脉高压存在凝血和纤溶系统异常，尽管原因不清，但可能会对肺动脉高压产生影响。Chaouat^[6]等研究指出，无论原发性还是继发性重度肺动脉高压均容易损伤血管内皮，诱发肺动脉血栓形成，这可能与血栓调节素和组织因子失衡、前列环素和一氧化氮释放异常及纤维蛋白溶解作用失效有关。重度肺动脉高压时凝血酶活性增强，抗凝系统的异常，尤其是在慢性血栓形成所致的肺动脉高压及原发性肺动脉高压，血小板活化与凝血酶的生成密切相关，活化的血小板能够为在促凝因素的作用下凝血酶的生成提供活性模板^[7]。肺循环中血小板的激活能释放几种介质调节血管张力及产生促有丝分裂作用，并作用于凝血酶及促进血凝块的生成,这些提示我们肺动脉高压时存在血栓形成作用，但并不清楚其产生的原因。目前较为一致的观点是P选择素水平能够反映血小板的活化和内皮细胞损伤^[8]，与肺动脉高压的相关报道较少。尽管诸多研究结果未能得出统一的结论，但将上述结果和我们的研究结果相比较，可以认为P选择素并不直接介导先心病所致的肺动脉高压。

 

参 考 文 献

1.郝芳之，杨兴季主编.临床儿科心脏病学.第1版.天津：天津科学技术出版社，1997：207.

2.Undar L,Akkoc N,Alakavuklar MN,et al.Flow cytometric analysis of circadian changes in platelet activation using anti-GMP-140 monoclonl antibody.Chronobiol Int,1999,16(3):335-342.

3.Schulman LL,Grossman BA,Owen J.Platelet activation and fibrinopeptide formation in pulmonary hypertension.Chest,1993,104(6):1690-1693.

4.Fuse S,Kamiya T.Plasma thromboxane B2 concentration in pulmonary hypertension associated with congenital heart disease.Circulation,1994, 90(6):2952-2955.

5.Welsh CH,Hassell KL ,Badesch DB ,et al.Coagulation and fibrinolytic profiles in patients with severe pulmonary hypertension.Chest,1996,110: 710-717.

6.Chaouat A,Weitzenblum E,Higenbottam T.The role of thrombosis in severe pulmonary hypertension.Eur Respir J,1996,9(2):356-363.

7.Radziwon P,Boczkowska-Radziwon B,Schenk JF,et al.Platelet activation and its role in thrombin generation in platelet-induced thrombin generation time.Thromb Res,2000,100(5):419-426.

8.Davi G, Romano M, Mezzetti A, et al.Increased levels of soluble P-selectin in hypercholesterolemic patients.Circulation，1998,97:953– 957.