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- 刘继前主任医师 教授
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医院:
北京中医药大学东方医院
科室:
胸心血管外科
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- 作者:刘继前|发布时间:2009-02-20|浏览量:1052次
北京中医药大学东方医院胸心血管外科
刘继前 尚宪荣 曹建春 曹刚
摘要 目的 探讨血塞通对下肢缺血再灌注损伤的保护作用 方法 采用电子自旋共振技术和电子自旋共振捕集剂N-tert-butyl-2-phenylnitrone(PBN)观察兔下肢缺血再灌注时出现PBN-自旋加合物信号 结果 该信号强度与缺血时间有关,缺血4小时再灌注时的信号明显强于缺血2小时再灌注;血塞通对该自旋加合物信号有明显猝熄作用 结论 血塞通对下肢缺血再灌注损伤具有一定的保护作用北京中医药大学东方医院周围血管科刘继前
关键词 三期总皂甙(血塞通)游离基类 电子自旋共振
血塞通的主要成分是三七总皂甙。三七总皂甙具有活血祛瘀,通脉活络的功效。其药理机制可能与抑制脂质过氧化反应、保护组织抗氧化能力、扩张血管、改善微循环、影响自由基生成等有关。研究证实[1,2,3],三七总皂甙具有抗自由基O2、抗自由基OH?和增强SOD的活性。本试验以建立兔下肢缺血再灌注动物模型,用电子自旋共振(ESR)捕集剂2-苯基,N-特丁基硝酸灵(N-tert-butyl-2-phenylnitrone,PBN)捕集缺血再灌注时产生的自由基,观察PBN-自旋加合物的动态变化及其与缺血的关系,以探讨血塞通对下肢缺血再灌注损伤的作用。
材料与方法
材料 血塞通(黑龙江省珍宝岛制药有限公司,批号:Z20026437);新西兰大白兔24只,雌雄不限,1.5-2.5kg/只;戊巴比妥钠注射液;自旋共振捕集剂PBN(购自Sigma公司),浓度3mmol/L;TES-RE1X型电子自旋共振仪(购自日本);动物手术器械包。
方法 将兔随机分为3组:(1)对照组(假手术组,n=8);(2)缺血再灌注组(手术组,n=8);(3)缺血再灌注血塞通治疗组(手术治疗组,n=8)。试验前禁食12小时,自由饮水;经耳缘静脉注射戊巴比妥钠30 mg/kg 麻醉。假手术对照组分离两侧骼外动脉后不结扎,只予家兔双后肢松绕橡皮带,模拟捆扎;缺血再灌注组先夹闭两侧铭外动脉,再以橡皮带扎紧双后肢根部阻断血流,手术组和手术治疗组分别取4只2h后放开动脉夹、松开橡皮带,恢复血液灌注;其余4只4h后放开动脉夹、松开橡皮带,恢复血液灌注。
假手术组自耳缘静脉持续静脉点滴PBN;手术组在再灌注前开始自耳缘静脉持续静脉点滴PBN;治疗组在再灌注前开始自耳缘静脉持续静脉点滴PBN加血塞通30mg/kg。缺血再灌注1h时自颈外静脉取血3mL,加人枸橼酸钠抗凝,将上述静脉血加入0.5ml甲苯猛烈振荡后离心(3000r/min)10min,取上层甲苯置于石英管中,用TES-RE1X型电子自旋共振仪检测自由基信号;检测条件:微波功率10mW,X波段,高频调至100kHz,调至幅度2.5G,温度2000K。假手术组在相同时间采血对照。
结果
1. 对照组的血液均未检测到信号(图A)。
2. 缺血再灌注组:缺血2小时及4小时后再灌注检测到PBN-自旋加合物信号,缺血4小时后的信号比缺血2小时后要强(图B)。
3. 缺血再灌注血塞通治疗组:缺血2小时及4小时后再灌注检测到PBN-自旋加合物信号较缺血再灌注组均低(图C)。
讨论
随着器官移植、冠脉及外周动脉搭桥等手术病人的增多,缺血再灌注损伤临床颇见。氧自由基(OFR)是重要的炎性介质,缺血再灌注使氧自由基产生增加,导致组织损伤。王学梅等[5]研究表明,三七皂普能有效地清除超氧自由基及氢自由基,其中以清除OH一较为显著。罗伟等[6]研究表明,三七总皂试具有较强的抗氧自由基损防和抗脂质过氧化损伤作用,其作用机制可能在于其一方面减少氧自由基的产生,一方面通过激活抗氧化酶SOD活性,抑制氧自由基,降低脂质过氧化物,从而发挥抗脂质过氧化损伤的作用。
氧自由基与生物膜结合使脂质不饱和脂肪酸发生脂质过氧化,可产生以碳为中心的自由基;PBN可与自由基结合成相对稳定的寿命较长的自由基加合物,并且已证明PBN可进入各种细胞,PBN自旋加合物可以穿过细胞膜。本试验表明PBN自旋加合物信号强度与缺血时间有关,缺血4小时后的信号比缺血2小时后要强,缺血时间长,再灌注时自由基产生多。
血塞通的主要成分是三七总皂甙。本试验显示,血塞通明显抑制加合物的信号,说明它确有猝熄自由基的作用。因此临床上可应用血塞通来降低下肢缺血再灌注所造成的损伤。
参考文献
[1] 张天锡.脑损害脑水肿及其防治近展(1)[J] 临床神经外科杂志 , 200 4, 1: 1.
[2] 张天锡.脑损害脑水肿及其防治近展(2)[J].临床神经外科杂志 ,2004 ,1 :4 9
[3〕蒋健主编.《现代急诊内科学歼M].第2版.北京科学出版社,2005
[4] 王学梅,戴云,张建圣等.分光光度法测定三七皂甙清除活性氧自由基的研究.云南中医中药杂志2006;27:41-42
[5] 罗伟,田明,张新等.三七总甙对高血压病患者氧自由基及红细胞流变性的影响.安徽中医临床杂志2000;12:369-371
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