DC/CIK树突细胞免疫治疗模式

治疗前的准备

（1） 检查

1 血常规；

2 生化检查：肝、肾功能等，必要时进行心、肺功能检查；

3 基础免疫状态：淋巴细胞亚群及抗瘤因子（IL-2、IL-12、TNF-α、IFN-γ水平）；

4 肿瘤标志物检查：如CEA、CA125、PSA等；山东省肿瘤防治研究院肿瘤内科匡建民

5 影像学检测：肿瘤灶有无、大小等；

（2）签署知情同意书/委托书：见附件

（3）确定生物治疗方案

   1 确定是否需造血动员及动员方案；

2 确定肿瘤抗原来源：

      A：行手术患者者，建议手术时留取新鲜肿瘤组织；

      B：丧失手术机会者，建议首先根据肿瘤相关抗原进行HLA配型（HLA-A201），如配型阳性，则可采用多肽或细胞株作抗原；如配型阴性，则可采用人肿瘤细胞株作抗原。

肿瘤抗原的准备

（1）采集自体新鲜肿瘤组织

适用于行手术的肿瘤者。

采集部位：正常组织与癌组织交界处，尽量避开坏死部位；

组织大小：1-2cm³（根治术尽量选取肿瘤组织部分）

保存与运输：新鲜肿瘤组织直接置于组织贮放瓶内（含组织保存液），封口，

填写肿瘤标本申请单，置于冰瓶内，4-6小时内运输至DC制备室。

（2）肿瘤相关抗原多肽（如CEA、PSA等）

适用于丧失手术机会，或不能通过手术获得足够肿瘤组织，且HLA配型阳性患者；

（3）人肿瘤细胞株

适用于丧失手术机会，或不能通过手术或活检获得足够肿瘤组织，HLA配型阴性或阳性患者；

血液样本的采集

（1）采集标准

    据血常规及分类检测结果计算：若淋巴细胞与单核细胞的总数≥2×10⁹/L，则直接采血； 若当白细胞总数<6×10⁹/L或单核细胞和淋巴细胞数量之和<2×10⁹/L时，需进行造血动员。

（2）造血动员方案

GM-CSF皮下注射，75ug/次，bid，连续2-3天。

（3）采血

   根据治疗方案设定单采PBMC数量。

保存与运输：填写标签，贴于采血袋上，，1-2小时内运输至生物治疗中心。

回输方式

（1）DC回输方式

免疫方式：皮内注射

细胞数量：>5×10⁶（2ml生理盐水）

注射部位：淋巴结富集区（腋窝/腹股沟）10cm范围内，2-3点注射；

注射器：采用18G贝朗浅静脉留置针。

   免疫次数与疗程：四次DC免疫注射为一个疗程，时间次序如下：

   D0    D7      D14      D21     D28       D35       

   

    3^rd          

 

  取血    1^st     2^nd                4^th        检测

（2）CIK回输方式

免疫方式：静脉回输

细胞数量：>600×10⁶（100ml生理盐水）

注射部位：肘静脉回输，回输过程控制在1小时内，滴速约为30滴/分钟；回输过程中每隔10分钟摇匀细胞悬液一次，确保细胞均匀分布，避免形成细胞团块；

回输器材：输血皮条。

免疫次数与疗程：4-5次CIK免疫注射为一个疗程，时间次序如下（部分患者需要根据细胞扩增状况适当调整回输时间）：

   D0             D12   D14   D16   D18    D20              

   

  取血            1^st     2^nd    3^rd     4^th    5^th                    

生物治疗疗效评估

1 生活质量：KPS评分；

2 症状与体征改善；

3 治疗前后免疫功能：

   细胞因子水平监测：IL-2、IL-12、IFN-γ；

   淋巴细胞亚群：CD3/CD4/CD8/CD56, CD4/CD25；

4 肿瘤标志物水平监测： 如CEA、PSA等；

5 影像学检查：复发、转移出现的时间（病灶的增加/减少/消失）；

6 平均生存期、中位生存期、复发时间等；

⑦ DC/CIK细胞流式表型检测：CIK细胞表型检测同淋巴细胞亚群检测；

  DC细胞表型检测：成熟度：CD83⁺+CD11c⁺；

纯度：CD11c⁺+HLA-DR⁺

   共刺激分子的表达：CD86⁺+CD11c⁺ ；CD80⁺+CD11c⁺

注：DC免疫治疗检测的时间：分别于DC治疗前及全部治疗结束后一周进行检测，共二次。

生物治疗与常规治疗的联合应用的原则

(1) DC/CIK治疗的定位：辅助治疗有效清除残留的肿瘤细胞，预防转移复发；

(2) DC/CIK治疗最佳时机：

a.手术最大程度地减少肿瘤负荷后；

b.常规手段控制肿瘤发展后；

(3) 与常规治疗的配合：

a. 手术: 术后10天左右患者康复后可开展DC/CIK治疗；

b. 化疗：

1化疗药使用后10天即可进行DC/CIK回输，在DC输注后10天左右（CIK回输后3天左右）可进行化疗，并提高化疗药的敏感性；

2疗程-疗程之间；

c. 放疗：局部照射者（骨髓除外）可同时进行DC/CIK 治疗，提高特异性细胞免疫应答。