-
- 肖延风主任医师
-
医院:
西安交通大学第二附属医院
科室:
小儿内科
- 新生儿得了败血病可以治愈吗
- 儿童肥胖小常识
- 性早熟与饮食的关系
- 生长发育相关疾病义诊通知
- 内分泌干扰物对儿童青春期发育的...
- 性早熟治疗期间 家长应该注意哪...
- 那些情况提示可能有性早熟呢?
- 性别和生长激素的疗效有关系吗?...
- 生长激素(GH)对男孩青春期性...
- 身材矮小儿童为什么需要做一系列...
- 生长激素可以调节卵泡发育
- 生长激素缺乏症诊断的新方法
- 怎样判断孩子是否还能长高?
- 能够帮助孩子长高的运动
- 如何在家中正确测量身高--儿童...
- 冬天孩子长得慢 家长应该怎么办
- 导致矮小的原因有哪些?
- 陕西省快乐成长-矮小儿童夏令营...
- 矮小、肥胖义诊通知
- 那些矮小适合生长激素治疗?
- 正常儿童生长发育的三个阶段
- 怎样才知道生长激素注射治疗是否...
- 激素治疗过程中患者需知
- 如何上传高质量检查片子
- 性早熟或矮小症患者就诊后注意事...
- 注射生长激素治疗矮小症的疑虑
- 影响孩子身高的三大坏习惯
- 生长激素治疗矮小症的用法
- 矮小症和性早熟儿童饮食注意事项
- GH治疗对儿童期起病的GHD成...
- 影响孩子身高的后天因素
- 注射生长激素治疗中的疑虑--家...
- 注射生长激素治疗中的疑虑---...
- 在瑞典应用生长激素治疗SGA和...
- 儿童期肥胖与心血管风险因子对成...
- 生长激素缺乏(GHD)儿童常伴...
- 2005年儿童身高体重标准表(...
- 2005年儿童身高体重标准表(...
- 运动对GH-IGF轴的影响(文...
- 许多父母不知如何解读儿童生长曲...
- 婴儿期开始应用rhGH的GHD...
- 生长激素可用于6岁以下出生时小...
- 心理社会环境不良可致儿童生长迟...
- 性早熟的问题
- 生化检验显示矮小儿童和青少年钙...
- 特发性矮小的定义与治疗难题
- 暴饮暴食可快速抑制生长激素分泌...
- 重组人生长激素治疗可改善生长激...
- 生长激素代替治疗能改善生长激素...
- 西安交通大学第二附属医院儿科小...
- 高剂量重组人生长激素治疗青春期...
- 生长激素治疗 ISS儿童达终身...
- 调节长骨生长板发育的生长因子和...
- 儿童肥胖与2型糖尿病相关疾病的...
- 肥胖儿童的“交通灯饮食”
- 环境内分泌干扰物对青春发育和生...
- 环境内分泌干扰物是什么?它们从...
- 睡眠对孩子生长的重要性
- 生长激素制剂的发展历程
- 关于骨龄
- 关注肥胖男孩外生殖器发育
- 遗传性矮小症好治吗
- 用生长激素治疗的安全性
- 什么是特纳氏综合征
- 我女儿需要用生长激素吗?
- 关注孩子长高,家长不能等待
- 警惕儿童性早熟
- 孩子身材矮小的真正原因
- 肥胖危害知多少?-----儿童...
- 孩子学习压力过大可影响身高发育
- 性早熟诊治指南
- 三大坏习惯影响孩子长高
- 身材矮小多数情况下也是病
- 矮小必须科学治疗,切勿轻信广告...
- 矮小症、性早熟儿童饮食睡眠等注...
- 孩子身材矮小 早发现早治疗
- 两种不同剂型重组人生长激素在体生物活性比较
- 作者:肖延风|发布时间:2010-04-14|浏览量:1629次
中国生化药物杂志 C h i n e s e J o i n" h a l o f B i o c h e mi c a l P h a r ma c e u t i e s 2 0 0 8年第 2 9卷第 6期
两种不同剂型重组人生长激素在体生物活性比较 西安交通大学医学院第二附属医院小儿内科肖延风
王亚敏 ,李湛军
( 1 .国家食品药品监督管理局 药品审评中心,北京 1 0 0 0 3 8 ; 2 .中国药品生物制品检定所 北京 1 0 0 0 5 0 )
摘 要 : 目的 比较 两种不 同剂型的重组人生长激素在体生物活性 。方法 以摘除脑垂体的雄性大鼠为动物模型 , r h G H 国家标准品为对照 , 应用量反应平行线原理,6 d总量的高剂量1 0. 7 I U /k g 、低剂量 2 、7 I U / k g ,按体重增加法和胫骨骨骺板 增宽法分 别测 定 r h GH注射液( T 1~_ r 4 ) 和注射用 r h G H( T 5~T 1 1 ) 的生物活性 ,并比较两种剂型的比活性。结果 r h G H注射液比活性比注射用 r h G H的比活性高( P<0. 0 1 ) 。结论 r h GH注射液比注射用 r h GH的比活高。
关键词 :重组人 生长激素注射液 ;注射 用重组人生长激素 ;在体 ;生物活性
重组人生长激素 ( r e c o mb i n a n t h u m a n g r o w th h o r ? mo n e , r h GH) 临床不仅用于治疗儿童内源性生长激素 ( GH) 缺乏引起的矮小症 、 T u r ne r 综合征等疾病_ l J , 还 可抗衰老 、 提高机体机能, 治疗骨质疏松症 、 心血管 疾病l 2 J 、 艾滋病患者的脂肪代谢障碍l 3 J 等。目前临床应用有注射用 r h G H冻干粉针剂及 r h G H注射液 , 虽已临床证实这两种不同剂型 r h G H生物等效 ,均能安全有效的用于临床_ 4 J ,二者药代动力学指标差
作者简介:王亚敏( 1 9 6 8 一 ) , 男, 硕士、 副主任药师, E - m a i l : y a mi n .
wa n g 20 04@ y a ho o. c o i n. c n。
1 材 料
1 . 1 药品
见表 1 。其中 T 1 ~T 6由长春金赛药业有限责 任公司生产 ; T 7 ~T 1 1 均为进 口产品。 r h G H国家 标准 品 , 批 号 : 1 4 0 6 3 5 ? 2 0 0 6 0 3 , 规格 3 . 3 I U: 1 . 1 m g , 中国药品生物制品检定所 ; 氨基甲酸 乙酯 ( 乌拉坦) , 北京化工厂生产 , 批号 9 4 0 2 2 0 , 化学 纯 ; 牛血清白蛋 白冻干粉 , 北京经科化学试剂公司进 口分装。 中国生 化药物杂志 C h i n e s e J o u r n a l o f B i o c h e mi c a l P h a r ma c e u t i c s 2 0 0 8年第 2 9卷第 6期 3 93
1. 2 动 物
大鼠, Wi s t a r 种, S P F级, 雄性, 出生 2 6 ~2 8 d , 体 重 6 0~8 0 g , 中国药品生物制品检定所实验动物 中 心提供, 动物合格证号: S Y X K( 京) 2 0 0 6 ? 0 0 0 4号。实 验动物室为无菌空气二级过滤 , 人工 日光灯 1 2 h自 动照明 , 恒温 、 恒湿 送风 , 温度 2 2~2 4 ℃, 相对 湿度 4 0 % ~ 4 5 %。动物笼具为不锈钢丝,体积为 :大鼠笼 4 0 e m ×3 0 o n ×2 0 em。
2 方 法
以中国药典 J 生长激素生物测定法即去脑垂体大鼠体重法和胫骨法为实验依据 ,量反应平行线2?2 法实验设计进行试验。
2. 1 大鼠脑垂体切除术
试验前 2 ~3周按文献[ 7 ] 方法对大鼠施摘除垂体手术 ,术后于二级实验室大 鼠饮用 5 %葡萄糖溶
液至少 3 d , 喂饲标准饲料 , 使其恢复备用。
2. 2 筛选合格动物与动物分组
取去垂体手术后 2周 , 体重变化小于手术前 ± 1 0 %的大鼠 6 培 ] , 视为合格动物可用 于实 验, 并按体 重均匀分组 , 每组 8只, 分为标准品高 、 低剂量组 , 供 试品( T 1 ~ T 1 1 ) 高、 低剂量组。
2. 3 给药
标准品高剂量 l 0. 7 I U / k g 、 低 剂量 2. 7 I U / k g, 以 0 . 1 %牛血清白蛋 白的生理盐水溶液为溶媒配制 溶液, 分 6次给药 , 每鼠每天同一时问颈部皮下注射 剂量一致, 给药方式相同。
2. 4 检 测 指标
每只合格去垂体大 鼠于给药前编号 、 记 录体重 并于给药结束后检测[ 6 - 7 ] 。
2 . 4 . 1 体重增加 r h G H最后 1 次给药后 2 4 h , 处死 大鼠称重 , 与给药前体重 比较。必要时实验结束后 进行尸检 , 切开蝶鞍 区, 肉眼检查有无垂体残 留, 剔 除有垂体残存的动物。
2 . 4 . 2 骨骺板宽度 实验结束后 , 处死的大 鼠刨取 后两腿胫骨, 剥离掉肌 肉等组织 , 硝酸银染色 , 测量 时沿刨面切 1 m m左右薄片置生物显微镜下( ×1 0 0 ) 测量胫骨骨骺板宽度 , 以生物图像分析系统软件 ( 北 京清大德人科技有限公司) 定量测量胫 骨骨骺板宽 度( 每鼠两腿胫骨测量 1 0个数值取其平均值) 。
2. 5 数据 处理
生物效价计算按 中 国药典[ 6 1 及其统计软件_ 8 ; r h G H注射液与注射用r h G H的比活性比较应用 检验。
3 结果与讨论
供试 品 T 1~T 1 1 , 按去脑垂体大 鼠体重法和胫 骨法测定 , 经生物统计实验可靠性测验需通过后 , 分 别计算体重法和胫骨法效价( p o t e n c y , P r I 1 ) , 以及两种 法合并计算 , 并按 I U / m g 计算各供试品比活性 , 结果 见表 1 。比较 r h G H注射液与注射用 r h G H比活性 , 发现 r h G H注射液的 比活性 比注射用 r h G H的比活 性 明显高 , 2组数据间经 t 检验 , P<0 . 0 1 , 二者问差 0 . 5 m L , 1 次/ d , 连续 6 d ; T 1 ~T 1 1 与标准 品的高、 低 异具有非常显著性意义 。
表 1 供试 品 T 1~T 1 1在体生物测定结果
T a b 1 Th e r e s u l t s o f s a mp l e T1 一 T1 1 b y b i o a s s a y i n r i v e 3 9 4 中国生化药 物杂志 C h i n e s e J o u r n a l o f B i o c h e mi c a l P h a r ma c e u t i c s 2 0 0 8年第 2 9卷第 6期 研发蛋 白药 物面临最大挑 战之 一是蛋 白稳定 性_ 9 J 。为使其稳定 , 通常采用冷冻干燥技术 , 即利用 冷冻的溶液在低温低压条件下, 从冻结状态不经过 液态直接升华除去水分完成 干燥 , 使药物保持原有 的理化性质和生理活性 , 它特有的疏松多孔结构 , 可 以使药物易于重新复水而恢复活性 , 而且冻干制剂 含水量低 , 易长期稳定保存 , 是生物技术药物的常用 剂型。与水针制剂相比, 冻干制剂尽管具有稳定等 优点, 但冷冻干燥 的过程非常复杂 , 在预冷第一 、 第 二干燥阶段和储存过程 中, 药物的结构可能受其中 的物理化学变化影响而发生变化, 特别是蛋 白质多 肽类药物的二、 三级结构易受破坏 , 失去活性而影响 药效[ 1 0 - 1 2 ] 。并且再次溶解过程 , 蛋 白质有可能断裂 而破坏活性。近年来越来越多学者研发蛋白药物注 射液, 不断提高其稳定性_ 9 j , 保持其鲜活性 , 提高患 者依从性 。注射液中应用适 当的防腐剂( 苯酚) 和缓 冲液( 组氨酸代替柠檬酸、 磷酸) , 临床试验表明注射 疼痛减轻l 1 。本研究中 r h G H注射液的比活性 比注
射用 r h G H冻干剂的比活性明显高( P<0 . 0 1 ) , 但临 床报道较少 , 为期 2年的多中心Ⅲ期临床研究 , 治疗 儿童内源性 G H缺 陷症 证实 , r h G H注射 液 ( S o m a t . r o p i n S o l u t i o n, S a n d o z ) 比 r h GH粉 针 ( S o ma t r o p i n P o w . d e r , S a n d o z ) 平均增高速率仅多 0 . 2 c m / y ( n=8 9 ) , 二 者具有相同的治疗功效、 相似 的安全性 和相似的潜 在 免 疫 原 性_ 1 。1 9 9 9年 诺 和 诺 德 公 司 ( N o v o N o r d i s k ) 上市的 r h G H注射液( N o r d i t r o p i n S i m p l e X x ) , 考虑到患者长期每天皮下给药的痛苦 , 为避免给药 前再度复原水剂, 因粉针溶解过程被认为是复杂 、 危 险的, 是引起病人不满的主因, 采用先进的笔式给药 系统 N o r d i P e n , 即没有针头又有 自动插入装置注射 系统 , 使注射变得无痛而简单、 方便, 使患者依从性 辱高_ l 。G e n e n t e c h公 司的 r h G H注射 液 ( N u ? t i " o p i n ) 、 N o v o No r d i s k公司的 N o r d i t r o p i n S i mp l e X x 、 S a n . d o z 公司的 r h G H注射液 ( S o m a t r o p i n S o l u t i o n ) 相继上 市; 国内现只有长春金赛药业有限责任公司的 r h G H 注射液上市 , 另有两家正在 申报 、 研发 中。 本研究不足之处在于没有进行多家 r h G H注射 液 比较 , 因国外产品没有进入中国市场 , 国内其它产 品正在研发阶段, 今后将进一步做比较研究。
参考文献:
[ 1 ] H i n d m a r s h P C , D a t t a n i M T. U s e o f g r o w t h h o r m o n e i n c h i l d r e n [ J ] . Na t C l i n P r a c t En d o c f in o l Me t a b, 2 0 0 6, 2 ( 5) : 2 6 0 . 2 6 8.
[ 2 ] H a r m a n S M, B l a c k m a n M R. U s e o f g r o w th h o r mo n e f o r p r e v e n t i o n o r t r e a t m e n t o f e f f e c t s o f a g l n g [ J ] . J G e r o n t o l S e r A B i o l S c i Me d S c i , 2 0 0 4 , 5 9 ( 7 ) : 6 5 2 . 6 5 8 .
1 3 j B e n e d i n i S , T e r r u z z i I , L a z z a r i n A, e t a 1. R e c o m b i n a n t h u m a n g r o w th h o r m o n e: r a t i o n a l e f or us e i n t h e t r e a t me n t o f HI V? as s o c i a t e d l i po dy s ? t r o p h y [ J ] . B i o D r u g s , 2 0 0 8 , 2 2 ( 2 ) : 1 0 1 . 1 1 2 .
[ 4 ] 张翼飞, 杜鹏飞, 徐敏等. 重组人生长激素2种制剂人体生物等 效性研究 [ J ] . 中国新药与临床杂志 , 2 0 0 5 , 2 4 ( 5 ) : 3 7 3 . 3 7 5 .
1 5 j J a c 0 b s e n L V, R o l a n P , C h r i s t e n s e n M S , e t a 1 . B i o e q u i v a l e n e e b e t w e e n r e a d y ? t o ? u s e r e c o m b i n a n t h u m a n g r o w t h h o r mo n e ( r h G H ) i n l i q u i d f o r ? m u l a t i o n a n d r h G H f o r r e e o n s t i t u t i o n [ J J . G r o w th H o r m I G F R e s , 2 0 0 0 , 1 0 ( 2 ) : 9 3 . 9 8 .
[ 6 ] 中国药典 ( 二部) [ S ] . 2 0 0 5 : 附录 1 0 7 , 附录 1 1 4 .
[ 7 ] 李湛军. 生长激素生物活性的测定方法[ M] / / 中国药品生物制 品检定所 . 中国药品检验标准操作规范 . 北京 : 中国医药科技 出 版社 , 2 0 0 5 : 4 2 7 . 4 3 1 .
[ 8 ] 沈连忠, 李波. 中国药典生物检定统计软件 B S 2 0 0 0 F o r Wi n d o w s 9 X[ J ] . 中国卫生统计 , 2 0 0 0 , 1 7 ( 6 ) : 3 3 0 .
[ 9 ] Wa n g W. I n s t a b i l i t y , s t a bi l i z a t i o n , a n d f o r m u l a t i o n o f l i q u i d p r o t e i n p h a r m a e u t i c a l s [ J ] . I n t J P h a r m, 1 9 9 9 , 1 8 5 ( 2 ) :1 2 9 .1 88 .
[ 1 0 ]刘占杰, 华泽钊. 蛋白质药品冷冻干燥过程中变性机理的研究 进展[ J ] . 中国生化药物杂志 , 2 0 0 0 , 2 1 ( 5 ) : 2 6 3 ? 2 6 5.
[ 1 1 ]武华丽 , 胡一桥 . 冷冻干燥 制剂的稳定性 研究进展 [ J ] . 中 国药 学杂志 , 2 0 0 1 , 3 6 ( 7 ) : 4 3 6 . 4 3 8 .
[ 1 2 ]张玉华, 凌沛学, 籍保平. 糖类在生物活性物质冷冻干燥中的保 护作用及其作用机制[ J ] . 中国生化药物杂志, 2 0 0 6 , 2 7 ( 4 ) : 2 4 7 . 2 49.
[ 1 3 ]K a p p e l g a a r d A M, B o j e s e n A, S k y d s g a a r d K, e t a 1 . L i q u i d g r o w th h o r ? m o n e : p r e s e r v a t i v e s a n d b u f f e r s [ J ] . H o r m R e s , 2 0 0 4 , 6 2 ( S u p p l 3 ) : 9 8 - 1 03.
1 1 4 j R o m e r T , P e t e r F , S a e n g e r P , e t a 1 . E f f ic a c y a n d s a f e t y o f a n e w r e a d y ? t o . u s e r e c o m b i n a n t h u m a n g ro w th h o r m o n e s o l u t i o n [ J ] . J E n d o c f i n o l I n v e s t , 2 0 0 7 , 3 0 ( 7 ) : 5 7 8 . 5 8 9 .
1 1 5 J I y o d a K, Mo r i w a k e T, S e i n o Y, e t a 1 . T h e c l i n i c a l u s e f u l n e s s o f l i q u i d h u ma n g r o w th h o r mo n e ( h GH) ( No r d i t r o p i n S i mp l e Xx i n t h e t r ea t me n t f G H d e f i c i e n c y [ J ] . H o r m R e s , 1 9 9 9 , 5 1 ( S u p p l 3 ) : 1 1 3 - 1 1 5 .
[ 1 6 ]S t a nh o p e R, B u c h a n a n C , B u f f e r G. e t a 1 . A n o p e n ? l a b e l a c c e p t a b i l i t y s t u dy o f No r d i t r o p i n s i mpl e Xx ? ? a n e w l i qu i d g ro wt h ho r mon e f or m u? l a t i o n [ J J . J P e d i a t r E n d o c r i n o l Me t a b , 2 0 0 1 , 1 4 (6 ) : 7 3 5 7 4 0. 1 1 7 J M U l l e r J , S k a k k e b a e k N E, J a c o b s e n B B, e t a 1 . N o r d i t r o p i n S i m p l e X x : a l i q u i d h u ma n g r o w t h h o r m o n e f o r m u l a t i o n, a p e n s y s t e m a n d a n a u t o ? i n - s e ~ i o n d e v i c e [ J j . H o r m R e s , 1 9 9 9, 5 1 ( S u p p l 3 ) : 1 0 9 ? 1 1 2 .
TA的其他文章: