抗O

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A族溶血性链球菌（A链）在生长过程中可产生多种毒素和酶，如链球菌溶血素O（SLO）、脱氧核糖核酸酶、链激酶、透明质酸酶等。A簇溶血性链球菌的重要代谢产物之一为链球菌溶血素“O”，具有一定抗原性，能刺激机体产生相应抗体。链球菌溶血素“O”是具有溶血性的蛋白质，能溶解人类和一些动物的红细胞。按此原理可在被检病人血清倍比稀释后，加入一定量的链球菌溶血素“O”，如病人血清中含有抗体（抗链球菌溶血素“O”），则链球菌溶血素“O”失去溶血能力，不溶血的管数越多表示抗链球菌溶血素“O”的效价越高。检测血清中的相应抗体，有利于A族溶血性链球菌感染的诊断。其中以抗链球菌溶血素O（ASO）抗体应用最广泛。山东大学第二医院儿内科柳方娥

一、原理：
被测血清中如有抗链球菌溶血素O（ASO），在与抗链球菌溶血素O（ASO）胶乳试剂反应时，可引起后者凝集。预先用2.5结合单位/ml SLO中和时，不出现凝集者说明血清中的ASO＜250U，仍出现凝集者，说明ASO＞250U。

二、试剂：
1、ASO胶乳试剂：将羧化聚苯乙烯胶乳与纯化的链球菌溶血素O（SLO）用碳化二亚胺交联，离心洗涤后，用PH7.6磷酸盐缓冲液配成1%悬液，加1.0g/L NaN3防腐。
2、2.5结合单位/ml链球菌溶血素O（SLO）：用生理盐水将液体链球菌溶血素O（SLO）稀释到2.5结合单位/ml（标定方法按常用Todd溶血法，滴度为250U的被测血清，1：50稀释后，与等体积2.5结合单位/ml SLO混合，其抗链球菌溶血素O（ASO）恰被中和）。

三、操作：
1、被测血清用生理盐水作1：50稀释，56℃30分钟灭活。
2、于方格涂黑玻璃板上，滴加灭活的稀释待测血清1滴，再滴加2.5结合单位/ml链球菌溶血素O（SLO）1滴，摇动玻片2?3分钟，使血清与链球菌溶血素O（SLO）充分混匀。
3、滴加抗链球菌溶血素O（ASO）胶乳试剂1滴，轻轻摇动玻片8分钟，观察结果。

四、结果判断：
无凝集者为阴性，有明显凝集者为阳性。阳性血清应复试。将中和用的溶血素O改为5.0结合单位/ml，再按上法检测，如结果仍为阳性，则报告为强阳性。
五、注意事项：
1、血清溶血、黄疸、高胆固醇和血清污染长菌者皆可使ASO升高；
2、加入溶血素应以旋转式轻轻摇匀，以防还原溶血素重新氧化；
3、每次试验应以已知血清滴定抗原效价，正式试验亦需有已知血清作对照。

六、临床意义：
1、溶血性链球菌感染1周后，ASO即开始上升，4?6周内达高峰。风湿热病人于感染后4?6周时，

80%可见ASO增高，如有血沉增快及白细胞增多，应结合临床表现，考虑风湿活动。
2、高胆固醇血症、巨球蛋白血症及多发性骨髓瘤病人，ASO也可增高，可能被检血清中有某种抑制溶血的物质存在。