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- HLA基因配型在器官移植中的临床意义
- 作者:赵磊|发布时间:2011-07-29|浏览量:1463次
HLA基因配型在器官移植中的临床意义
及检测技术
Human leukocyte antigen gene 人类白细胞抗原
l HLA基因复合体位于6q21.3,全长3500kb,又称主要组织相容性复合体(major histocompatibility complex MHC)
北京大学第三医院泌尿外科赵磊
lHLA抗原分子是HLA基因的表达产物,主要分布在细胞膜上,是个体免疫系统区分“自我”与“非我”的标志。HLA-Ⅰ类抗原分子的分布相当广泛,几乎见于所有的有核细胞。HLA-Ⅱ类抗原分子的分布不如Ⅰ类抗原广泛,主要表达于某些免疫细胞的表面:如B细胞、单核巨噬细胞、激活的T细胞、树突状细胞,内皮细胞和某些组织的上皮细胞也有HLA-Ⅱ类抗原分布。
l在同种异体移植排斥反应中异体HLA抗原分子是引起移植物排斥反应攻击的主要移植抗原。
HLA配型
用血清学或分子生物学的方法测定供受者的HLA抗原类型或基因类型,尽可能选择在具有相同或相似的HLA抗原的供受者之间进行器官移植的选配过程。
我泌尿外科配型实验室采用德国Biotest PCR-SSP ABDR配型试剂盒对供受者双方进行HLA基因分型。此分型技术具有以下优点:(1)准确性高:各引物按照各等位基因特异序列设计,遵循碱基互补原则,对等位基因分型的分辨率和准确性明显优于血清学方法。自带的阴性对照和阳性对照便于质控。(2)灵敏性好:序列特异性等位基因片段在PCR反应中以指数形式扩增,可增加数百万倍至一亿倍。分型所需血液标本极少,且无须保持血细胞活性,送检过程简便,便于临床使用。
我们严格遵循交叉反应组(CREG)配型原则,加之我院供肾来源广泛,就诊的肾移植患者ABDR六位点配型相合程度均≥3个位点。良好的HLA配型为提高移植肾存活率提供了有力保证。
HLA抗体检测技术与器官移植
受者体内含有高滴度的HLA抗体称为致敏。致敏的主要原因可以归纳为既往移植物排斥、术前输血史、妊娠史三大类。根据抗体水平的高低,可分为未致敏(PRA 0~10%)、轻度致敏(PRA 10~50%)、中度致敏(PRA50~80%)、高度致敏(PRA80~100%)。
早期的研究显示致敏抗体与肾移植超急性排斥反应密切相关。随后的研究表明,致敏抗体还与移植物功能延迟、急性排斥反应及移植肾长期存活率降低有关。
HLA抗体检测的临床用途:
(1)动态监测受者HLA抗体水平,决定手术时机。
(2)确定抗体的特异性,避免选用具有相应靶抗原的供体器官。这对于致敏的预术患者尤为重要。
(3)监测移植后HLA抗体水平,有助于了解机体免疫状况,帮助调整免疫抑制治疗方案。
我泌尿外科配型实验室采用基于ELISA技术的美国One Lambda公司LAT抗原板检测受者体内抗HLA抗体。该技术既可测定补体结合的HLA抗体,也可测定不与补体结合的HLA抗体,而且结果不受IgM的干扰,同时检测HLA-Ⅰ、Ⅱ类IgG抗体,确定抗体水平,自动分析抗体的特异性。同时完成抗体的定性和定量检测。
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