红细胞膜缺陷症 - 检验

　　红细胞膜缺陷的检验包括红细胞渗透脆性试验、自身溶血试验及其纠正试验、酸化甘油溶血试验、蔗糖溶血试验、酸化血清溶血试验、红细胞膜蛋白电泳分析。

　　1、红细胞渗透脆性试验

　　原理：检测红细胞对不同浓度低渗盐溶液的抵抗力。红细胞在低渗盐溶液中，当水渗透其内部达一定程度时，红细胞发生膨胀破裂。根据不同浓度的低渗盐溶液中红细胞溶血的情况，通过红细胞表面积与容积的比值，反映其对低渗盐溶液的抵抗性。比值愈小，红细胞抵抗力愈小。反之抵抗力增大。

　　参考值：开始溶血0.44％～0.42％（NaCl液)，完全溶血0.34％～0.32％（NaCl液)。

　　临床意义：脆性增高见于遗传性球形细胞增多症、椭圆形细胞增多症等；降低见于阻塞性黄疸、珠蛋白生成障碍性贫血、缺铁性贫血等。

　　2、自身溶血试验及其纠正试验

　　原理：红细胞在37℃孵育48小时，其间由于膜异常引起钠内流倾向明显增加，ATP消耗过多，或糖酵解途径酶缺乏所引起ATP生成不足等原因可导致溶血，称为自身溶血试验。在孵育时，加入葡萄糖或ATP作为纠正物，观察溶血可否有一定的纠正，称为纠正试验。

　　参考值：48小时内不加纠正物的溶血度小于3.5％，加葡萄糖溶血度小于1.0％，加ATP的溶血度小于l.0％。

　　临床意义：膜缺陷患者溶血度增加，加纠正物可被纠正；G6PD缺陷症者溶血度轻度增加，能被葡萄糖纠正；自身免疫性溶贫溶血度轻度增加，加葡萄糖无预示价值；PNH本试验常正常。

　　3、酸化甘油溶血试验

　　原理：当甘油存在于低渗溶液氯化钠磷酸缓冲液时，可阻止其中的水快速进入红细胞内，使溶血过程缓慢。但甘油与膜脂质又有亲和性，可使膜脂质减少。当红细胞膜蛋白及膜脂质有缺陷时，它们在pH6.85甘油缓冲液中比正常红细胞溶解速度快，导致红细胞悬液的吸光度降至50％的时间（AGLT50)明显缩短。

　　参考值：AGLT50大于1800s（30min)。

　　临床意义：减少见于遗传性球形细胞增多症（25～150s)、肾功能衰竭、慢性白血病、自身免疫性溶贫和妊娠妇女。

　　4、蔗糖溶血试验

　　蔗糖溶血试验为PNH简易重要的筛查试验。

　　原理：PNH患者的红细胞，在低离子强度的蔗糖溶液中对补体敏感性增强。经孵育，补体与红细胞膜结合加强，蔗糖溶液进入红细胞内，导致渗透性溶血。

　　参考值：定性试验：正常为阴性；定量试验：正常溶血率<5％。

　　临床意义：PNH患者为阳性或溶血率增加。自免溶贫有的可为阳性，白血病、骨髓硬化时可出现假阳性。

　　5、酸化血清溶血试验

　　原理：阵发性睡眠性血红蛋白尿症（PNH)患者体内存在对补体敏感的红细胞。酸化血清溶血试验，也称Hamtest，即红细胞在酸性（pH6.4～6.5)的正常血清中孵育，补体被激活，PNH红细胞破坏而产生溶血。正常红细胞不被溶解，无溶血现象。

　　临床意义：阳性主要见于PNH，某些自身免疫性溶血性贫血发作严重时可呈阳性。

　　6、红细胞膜蛋白电泳分析

　　原理：将制备的红细胞膜样品进行SDS-PAGE电泳，根据样品中各蛋白相对分子质量的不同，分离得到红细胞膜蛋白的电泳图谱，从而可见各膜蛋白组分百分率。

　　参考值：各种膜蛋白组分百分率变化较大，多以正常红细胞膜蛋白电泳图谱作比较，或以带3蛋白为基准。

　　临床意义：许多溶血性疾病常见红细胞膜蛋白异常。各种膜缺陷疾病，如遗传性球形红细胞增多症，有收缩蛋白等含量减低或结构异常。某些血红蛋白病骨架蛋白可明显异常。